L'analyse microbiologique des aliments a pour objectif de contrôler la qualité marchande et la qualité hygiénique des denrées alimentaires.
on désigne par levures et moisissures,l'ensemble des micro organismes capable de donner naissance à des colonies visibles à l’œil après 3 à 5 jours d'incubation à 30°C dans un milieu sélectif.
On ensemence en profondeur un milieu de culture sélectif déterminé,coulé deux boites de pétri de la suspension mère dans les mêmes conditions,on ensemence des dilutions décimales obtenues de la suspension mère dans les mêmes conditions.
pour le milieu de culture on utilise le gélose à l'extrait de levure au dextrose et au chloramphénicol ou le gélose à l'oxytetracycline (OGA).
Le dénombrement est effectué sur milieu solide.
on prend deux boites de pétri stériles et on transfère dans chacune de ces boites à l'aide d'une pipette stérile 1 ml de la suspension mère.
on prend deux autres boites de pétri stériles et on transfère dans chacun de ces boites à l'aide d'une nouvelle pipette stérile 1 ml de la dilution 1/100.
On coule dans chaque boite de pétri environ 15 ml de la gélose à l'extrait de levure au dextrose et au chloramphénicol.
Le temps qui s’écoule entre la fin de préparation de la suspension mère et le moment ou le milieu est coulé dans les boites ne doit pas dépasser 15 mn.
On mélange soigneusement l'inoculum au milieu et on laisse se solidifier et on les place à l'étuve à 25°C pendant 4 à 5 jours.
On utilise les dénombrements à partir des boites contenant moins de 150 colonies.
N= somme de C/(n1+0.1n2)
somme de C est la somme des colonies comptées sur toutes les boites retenues.
n1:le nombre de boites comptées de la premiere dilution.
n2:le nombre de boites comptées à la deusieme dilution.
d:dilution à partir de laquelle les dénombrements sont obtenus.
Remarques importants:
Éliminer les boites qui ont plus de quart de leur surfaces couvertes des colonies envahissantes.
si le rapport de deux moyennes et des deux dilutions successives est inférieur à 2,le nombre total de germes sera représenté par la moyenne arithmétique des deux boites multipliée par les facteurs de dilution.
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